工業(yè)產(chǎn)油微藻能通過光合作用將二氧化碳與光能大規(guī)模地轉(zhuǎn)化為油脂,因此作為一種清潔能源生產(chǎn)和二氧化碳高值化的潛在方案,在國內(nèi)外受到了廣泛關注。針對如何提升工業(yè)產(chǎn)油微藻的固碳能力這一關鍵問題,中國科學院青島生物能源與過程研究所示范了一種通過調(diào)控RuBisCO(核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶)的激活酶來增強細胞固碳活性,從而大幅度提高微藻生物質(zhì)與油脂產(chǎn)率的策略。該工作在線發(fā)表在Algal Research上。
工業(yè)產(chǎn)油微藻CO2固定與轉(zhuǎn)化效率的大幅提升,是微藻能源產(chǎn)業(yè)實現(xiàn)經(jīng)濟可行性的瓶頸之一,一直是學界與產(chǎn)業(yè)界的關注焦點。在藍細菌、萊茵衣藻等模式單細胞光合生物中,圍繞固碳能力提升,前期學界主要通過對光合作用中的固碳酶RuBisCO本身進行修飾,或通過調(diào)控碳酸酐酶等來提高RuBisCO周圍的CO2濃度。但在工業(yè)產(chǎn)油微藻中,針對固碳能力的分子育種,則尚未有成功先例。
微擬球藻是一種可利用海水或淡水、在室外大規(guī)模培養(yǎng)的工業(yè)微藻,具有生長速度快、二氧化碳耐受能力強、強勁積累油脂和高值不飽和脂肪酸等優(yōu)點,因此已成為工業(yè)微藻分子育種的主要模式研究體系之一,也成為國內(nèi)外許多微藻規(guī)模培養(yǎng)示范工程的優(yōu)先選擇。
基于前期CO2脅迫誘導下微擬球藻轉(zhuǎn)錄組研究,青島能源所單細胞中心功能基因組團隊的魏力、徐健等發(fā)現(xiàn)一個由細胞核基因組編碼的RuBisCO活化酶(nuclear-encoded RuBisCO activase,簡稱nRCA)在特定時間點顯著上調(diào),預示其在細胞固定CO2機制中起著重要作用。RuBisCO活化酶能影響RuBioCO的空間構型,阻止后者與其抑制物(磷酸糖)的結合,從而使后者保持活性狀態(tài);Rubisco活化酶還具有ATP水解酶活性,能調(diào)控ATP/ADP比值變化,從而影響葉綠體內(nèi)的能量平衡。
研究人員發(fā)現(xiàn),在空氣水平CO2濃度下,與野生型相比,過表達該內(nèi)源nRCA的微擬球藻藻株,其生長速率提高32%,生物質(zhì)累積率提高46%,油脂產(chǎn)率提高41%。在光合自養(yǎng)條件下顯著提升生物質(zhì)與油脂產(chǎn)率的同時,總脂中脂肪酸的組成卻基本未發(fā)生改變,從而實現(xiàn)了在保障油脂質(zhì)量前提之下油脂生產(chǎn)強度的大幅提升。根據(jù)公開文獻,這是工業(yè)產(chǎn)油微藻中通過改造光合固碳途徑提高生物質(zhì)與油脂產(chǎn)率的首次報導。
RuBisCO是由大、小兩種,各八個亞基組成的多聚體,其分子量高達~500 kD。調(diào)控與改造這種高度精密的大型分子機器,通常具有相當?shù)碾y度。最新工作表明,在工業(yè)產(chǎn)油微藻中,理性調(diào)控與設計以nRCA為代表的RuBisCO之“功能伴侶”,而非僅僅瞄準RuBisCO本身,將可能對CO2固定、生物質(zhì)合成乃至目標產(chǎn)物生產(chǎn)效率的提高起到“四兩撥千斤”的效果。預計此方法將成為設計與改造微藻光合固碳系統(tǒng)的高效策略之一。
在微藻細胞中,從CO2到高含能或高值目標分子的轉(zhuǎn)化過程可大致劃分為“碳捕獲”、“碳分配”與“碳存儲”等三個關鍵環(huán)節(jié)。通過在“碳捕獲”環(huán)節(jié)運用上述策略進行成功改造,同時結合該團隊前期在下游兩個環(huán)節(jié)的機制研究與代謝工程,研究人員正在全方位、多位點地設計與構建“高效固碳、精準合成、規(guī)模培養(yǎng)”的“超級工業(yè)微藻細胞工廠”。
研究得到了中科院“CO2的人工生物轉(zhuǎn)化”重點部署項目、國家自然科學杰出青年基金等的支持。